Avaliação do papel dos Corpúsculos Lipídicos na Carcinogênes Esofágica / [Evaluation of the role of Lipid Corpuscles in Esophageal Carcinogens]

O câncer de esôfago (CE) é a sexta causa mais freqüente de morte por câncer. Existem dois tipos principais de CE: Carcinoma Epidermóide (CEE) e Adenocarcinoma (ADE). Para o desenvolvimento do CEE os principais fatores de risco são o consumo de tabaco e álcool, e para o ADE podemos citar o refluxo esôfago-gástrico, obesidade e o esôfago de Barrett (EB), uma condição onde o epitélio estratificado do esôfago é substituído por um epitélio colunar metaplásico intestinal. Corpúsculos lipídicos (CL) são inclusões citoplasmáticas envolvidas na produção de eicosanóides e são mais abundantes em células associadas a reações inflamatórias e neoplasias. Sabendo que o processo inflamatório desempenha um papel importante no CE, o objetivo deste trabalho foi avaliar o papel dos CLs no CE. Primeiramente foi avaliada a presença de CL em amostras humanas de esôfago. Não houve marcação para ADRP nas amostras de esôfago normal, entretanto, houve um aumento gradativo na marcação dessa proteína na evolução do ADE e a marcação em CEE foi positiva em apenas poucos casos. Avaliamos também linhagens celulares de CE e observamos um aumento no número de CL na linhagem de ADE (OE33), quando comparada à linhagem de esôfago normal (Het1A) e a linhagem de CEE (OE21), corroborando os resultados anteriores. Para entender como os CLs eram formados já nos estágios iniciais de desenvolvimento do ADE, a linhagem Het1a, foi submetida a insultos que mimetizam os principais fatores de risco associados ao ADE e foi observadoum aumento no número de CL quando incubada com pH ácido, ácidos biliares, nicotina e ácido oleico. Além disso, esses estímulos foram capazes de induzir aumento na expressão de genes associados à resposta inflamatória e também de gene envolvido no desenvolvimento do EB...

Esophageal cancer (EC) is the sixth most frequent cause of cancer death. There are two main types of EC: Epidermoid Carcinoma (EEC) and Adenocarcinoma (ADE). For the development of CEE, the main risk factors are tobacco and alcohol consumption, and for ADE we can mention esophagogastric reflux, obesity and Barrett's esophagus (BE), a condition where the stratifiedepithelium of the esophagus is replaced by an intestinal metaplastic columnar epithelium. Lipid droplets (LD) are cytoplasmic inclusions involved in the production of eicosanoids and are moreabundant in cells associated with inflammatory reactions and neoplasms. As the inflammatory process plays an important role in EC, the objective of this work was to evaluate the role of LDs in EC. First, the presence of LD was evaluated in human esophageal samples. There was no ADRP staining in the normal esophagus samples, however, there was a gradual increase in staining score of this protein inthe evolution of the ADE and in EEC cases ADRP staining was positive in only a few cases. We also evaluated EC cell lines and observed an increase in the number of LD in the ADE cell line (OE33) when compared to the normal esophagus cell line (Het1A) and the EEC cell line (OE21), corroborating the previous results. To understand how LDs were formed in the early stages of ADE development, the Het1a cell line was subjected to insults that mimic the major risk factors associated with ADE and an increase in the number of LD was observed when incubated with acidic pH, bile acids, Nicotine and oleic acid. In addition, these stimuli were able to induce an increase in theexpression of genes associated with the inflammatory response and gene involved in the development of BE. We also evaluated this stimulus in tumor cells and found that only the OE33 cell line showed increased LD number and increased expression of IL-8 and COX-2...

Papel do fator de transcrição NFAT1 na regulação do ciclo celular e na expressão de ciclinas / [Role of the transcription factor NFAT1 in the regulation of the cell cycle and in the expression of cyclins]

A família de fatores de transcrição NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) apresenta um papel central na regulação de diversos genes relacionados com a resposta imune e recentemente foram implicados na proliferação e diferenciação de diversos tipos celulares. Nossos resultados mostram que os linfócitos B deficientes para NFAT1, quando estimulados pelo BCR, proliferavam mais, apresentavam um aumento do número de células na fase G1 do ciclo celular e um aumento na expressão dos genes das ciclinas A2, E1 e E2. Além disso, o silenciamento do NFAT1 aumentou a proliferação de uma linhagem celular de células B. Análises adicionais demonstraram que a expressão ectópica de NFAT1 em células CHO inibiu a proliferação celular, a expressão das ciclinas A2, E1 e E2, a formação de colônias in vitro e o crescimento tumoral in vivo. Juntos estes resultados indicam que o NFAT1 apresenta um papel de regulador negativo do ciclo celular

Papel do fator NFAT1 na regulação do ciclo celular e na expressão de ciclinas

A família de fatores de transcrição NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) apresenta um papel central na regulação de diversos genes relacionados com a resposta imune e recentemente foram implicados na proliferação e diferenciação de diversos tipos celulares. Nossos resultados mostram que os linfócitos B deficientes para NFAT1, quando estimulados pelo BCR, proliferavam mais, apresentavam um aumento do número de células na fase G1 do ciclo celular e um aumento na expressão dos genes das ciclinas A2, E1 e E2. Além disso, o silenciamento do NFAT1 aumentou a proliferação de uma linhagem celular de células B. Análises adicionais demonstraram que a expressão ectópica de NFAT1 em células CHO inibiu a proliferação celular, a expressão das ciclinas A2, E1 e E2, a formação de colônias in vitro e o crescimento tumoral in vivo. Juntos estes resultados indicam que o NFAT1 apresenta um papel de regulador negativo do ciclo celular.

The NFAT (Nuclear Factor of Activated T cells) family of transcription factors plays a central role in the regulation of several genes related to the immune response and has been recently implicated in the proliferation and differentiation of numerous cell types. Our results show that NFAT1-deficient Blymphocytes stimulated through BCR proliferate more, present an increase in the number of cells in the G1 phase of the cell cycle and an up regulated expression of cyclins A2, E1 and E2 when compared to wild type. Also, silencing of NFAT1 increased the proliferation rate of a B cell line. Further analyses demonstrated that ectopic expression of NFAT1 in CHO cells inhibited cellular proliferation, cyclins A2, E1 and E2 expression, colony formation in vitro and tumor growth in vivo. Together, these results indicate NFAT1 as a negative regulator of the cell cycle.